這篇文章《Inhibition of fatty acid uptake by TGR5 prevents diabetic cardiomyopathy》發(fā)表于Nature Metabolism（IF 18.9）雜志。該研究由來自北京大學(xué)第三醫(yī)院、中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院阜外醫(yī)院、北京大學(xué)等多個單位的研究人員共同完成。

研究背景

糖尿病心肌?。―bCM）是糖尿病引發(fā)的常見特異性心肌疾病，嚴(yán)重影響患者心臟健康和生活質(zhì)量。其以心肌脂質(zhì)積累和心臟功能障礙為顯著特征，疾病發(fā)展中會出現(xiàn)心肌重塑，導(dǎo)致心臟收縮和舒張功能受損，最終引發(fā)心力衰竭。發(fā)病機制主要是代謝失衡，尤其是脂質(zhì)代謝失衡，糖尿病狀態(tài)下胰島素抵抗使脂肪分解增加，循環(huán)中游離脂肪酸增多被心肌細(xì)胞攝取，產(chǎn)生脂毒性，干擾能量代謝。糖尿病的長期高血糖狀態(tài)和胰島素抵抗是主要致病因素，前者直接損傷心肌細(xì)胞，后者導(dǎo)致脂質(zhì)代謝紊亂并影響心肌細(xì)胞對胰島素的敏感性。目前主要通過心臟超聲、MRI等影像學(xué)檢查結(jié)合血液檢測指標(biāo)進行綜合診斷，治療包括控制血糖血脂、改善代謝紊亂以及針對心臟功能障礙進行藥物治療等，本文還提出TGR5 - DHHC4通路或可成為干預(yù)糖尿病心肌病脂質(zhì)代謝的新治療靶點。

研究結(jié)果

(1) 心臟特異性TGR5缺失加重心臟功能障礙

該部分聚焦探究心臟特異性TGR5缺失對心臟功能的影響，研究人員先構(gòu)建HFD/STZ小鼠模型研究DbCM中膽汁酸代謝變化，發(fā)現(xiàn)糖尿病心肌損傷小鼠血漿和心臟組織中DCA水平降低。隨后利用心臟特異性TGR5基因敲除小鼠（TGR5^ΔCM）在HFD/STZ誘導(dǎo)的糖尿病模型和2型糖尿病遺傳模型中實驗，結(jié)果顯示在健康或糖尿病條件下，TGR5ΔCM小鼠與正常小鼠在體重、血糖、血脂等方面無顯著差異，但心臟功能顯著下降，心肌肥大和纖維化加劇，表明TGR5缺失會加重DbCM。

(2) TGR5 基因缺失會促進心肌脂質(zhì)積聚

為探究心臟功能障礙表型的潛在機制，研究人員評估脂質(zhì)代謝水平。研究發(fā)現(xiàn)，無論是HFD/STZ處理的小鼠，還是2型糖尿病遺傳模型小鼠，TGR5^ΔCM小鼠都比TGR5^fl/fl小鼠有更明顯的心肌內(nèi)脂質(zhì)積累，表現(xiàn)為ORO、BODIPY 493/503染色及TG水平檢測結(jié)果均顯示脂質(zhì)積累增加，原代新生小鼠心肌細(xì)胞中脂滴增多，TEM觀察到脂滴數(shù)量和大小增加 。脂質(zhì)組學(xué)分析表明，TGR5^ΔCM小鼠的FFA、DG和TG水平顯著升高，特別是FFA中的長鏈不飽和脂肪酸明顯增加，這說明TGR5缺乏會促進心肌脂質(zhì)積累。

(3) TGR5激活可預(yù)防心臟功能障礙和心臟脂毒性

研究人員為評估TGR5對預(yù)防心臟脂毒性的影響展開系列實驗。用TGR5激動劑INT - 777灌胃db/db小鼠12周，結(jié)果顯示，INT - 777可改善db/db小鼠心臟收縮和舒張功能、抑制心肌細(xì)胞肥大和纖維化、減少脂質(zhì)積累，但對db/db TGR5^ΔCM小鼠無效。用膽汁酸DCA或TCA處理HFD/STZ誘導(dǎo)的小鼠，其心臟功能和脂質(zhì)積累的改善依賴TGR5。另外，脂質(zhì)組學(xué)分析表明，INT - 777處理經(jīng)PA + OA處理的原代新生小鼠心肌細(xì)胞后，F(xiàn)FA、DG、TG水平以及FFA水平和長鏈脂肪酸均顯著減少。綜上，TGR5可能是潛在治療靶點，激活TGR5可預(yù)防心臟脂毒性和心臟功能障礙。

(4) TGR5 可抑制脂肪酸吸收和 CD36 的 PM 定位

研究表明，TGR5對心肌細(xì)胞脂肪酸代謝及相關(guān)蛋白復(fù)合物有重要影響。研究人員發(fā)現(xiàn)，糖尿病時，TGR5^ΔCM小鼠心肌脂肪酸攝取增加，TGR5激動劑可減少db/db小鼠長鏈脂肪酸攝取，且TGR5有助于維持脂肪酸氧化和線粒體功能。TGR5雖不影響CD36總蛋白水平，但TGR5ΔCM小鼠質(zhì)膜定位的CD36增多，INT-777處理則減少 。同時，TGR5抑制CD36-Fyn-Lyn復(fù)合物組裝，解釋了TGR5^ΔCM小鼠脂肪酸攝取量增加的現(xiàn)象。

(5) TGR5-DHHC4信號調(diào)節(jié)CD36棕櫚?；?o:p>

棕櫚酰化影響蛋白質(zhì)功能與定位，研究人源發(fā)現(xiàn)糖尿病小鼠心臟中棕櫚?；疌D36水平上升，TGR5ΔCM小鼠更高，INT-777處理可降低，抑制棕櫚?；軠p少心肌細(xì)胞脂肪酸攝取和脂質(zhì)積累，表明TGR5抑制CD36棕櫚?；５鞍踪|(zhì)棕櫚?；蒁HHCs催化，其中DHHC4和DHHC5介導(dǎo)CD36的棕櫚?；?，TGR5缺失增強CD36與DHHC4的結(jié)合，敲低DHHC4可降低CD36棕櫚?；?，TGR5對CD36功能的抑制依賴DHHC4，TGR5通過cAMP-PKA信號通路抑制DHHC4，TGR5-DHHC4信號在心肌細(xì)胞中介導(dǎo)CD36棕櫚?；?。

(6) DHHC4 KD可挽救TGR5缺陷小鼠的心功能障礙

研究人員為探究DHHC4在體內(nèi)的作用，對HFD/STZ誘導(dǎo)的TGR5^fl/fl和TGR5^ΔCM小鼠經(jīng)尾靜脈注射AAV9-cTNT-DHHC4，構(gòu)建心肌細(xì)胞特異性DHHC4-KD小鼠模型。超聲心動圖顯示，DHHC4基因敲低改善了HFD/STZ誘導(dǎo)的心臟功能障礙，逆轉(zhuǎn)TGR5缺失小鼠的心臟功能惡化。同時，敲低DHHC4減少了心肌脂質(zhì)積累、降低了心臟中CD36的棕櫚?；胶唾|(zhì)膜定位，還顯著降低了脂肪酸攝取，表明TGR5缺失導(dǎo)致的脂質(zhì)積累增加和心臟功能障礙依賴于DHHC4激活。

(7) 糖尿病患者體內(nèi) DCA 與心肌損傷的關(guān)系

研究人員旨在探究糖尿病心肌損傷與膽汁酸水平的潛在聯(lián)系，通過膽汁酸靶向代謝組學(xué)分析健康者、2型糖尿病伴左心室肥厚或心力衰竭患者的血漿膽汁酸。結(jié)果顯示，糖尿病伴左心室肥厚患者的DCA水平低于健康者，伴心力衰竭時更低。按性別分析，男女患者的DCA水平在患病時均降低且性別間無差異。相關(guān)性分析表明，血漿DCA水平與NT-proBNP呈負(fù)相關(guān)，與EF呈正相關(guān)。這些結(jié)果表明膽汁酸-TGR5通路參與糖尿病心肌病發(fā)展，有作為診斷標(biāo)志物的潛力。

研究結(jié)論

該研究發(fā)現(xiàn)膽汁酸受體TGR5在DbCM進程中意義重大，其通過TGR5-DHHC4通路，抑制脂肪酸轉(zhuǎn)運體CD36的棕櫚?；唾|(zhì)膜定位，減少脂肪酸攝取和脂質(zhì)積累，從而對DbCM起保護作用。糖尿病心肌損傷患者和小鼠的TGR5偏向性膽汁酸DCA水平顯著降低，TGR5缺失會加重DbCM小鼠的心臟病變，激活TGR5則可預(yù)防。此外，血漿DCA水平與糖尿病心肌損傷程度及心臟功能相關(guān)，或可作為DbCM的診斷標(biāo)志物，為DbCM的治療提供了新的潛在靶點和理論依據(jù)。

優(yōu)缺點

優(yōu)點

該研究借助多種小鼠模型與細(xì)胞實驗，綜合超聲心動圖、代謝組學(xué)等技術(shù)，詳細(xì)闡釋TGR5對心臟脂質(zhì)代謝及相關(guān)通路的影響。通過分析患者血漿膽汁酸，將研究與臨床緊密相連，為治療提供新靶點。實驗設(shè)計嚴(yán)謹(jǐn)，設(shè)置多組對照，還運用多種先進技術(shù)從不同角度驗證結(jié)果，說服力強。

缺點

研究存在臨床轉(zhuǎn)化困難的問題，如TGR5激動劑在人體的安全性和有效性未知。人體環(huán)境復(fù)雜，個體遺傳、腸道菌群等因素會干擾TGR5 - DHHC4通路，研究對此考量不足。此外，在機制研究上，TGR5經(jīng)cAMP - PKA信號通路調(diào)節(jié)DHHC4的具體分子機制等細(xì)節(jié)有待明確。